在内蒙古实验室系统工程中对药敏试验是严谨且细致的,那么药敏试验操作的步骤具体是什么呢?有哪些注意事项是我们要严格遵守的?下面一起来了解:
药敏试验操作步骤:
1.制作待检菌液
在超净工作台内挑取培养18-24h普通营养琼脂平板上的菌落,悬于含3ml无菌生理盐水的试管中。混匀后与比浊管比浊,调整浊度至0.5麦氏标准(相当于1-2*10 cfu/ml)。
2.接种细菌
在超净工作台内用无菌棉拭子蘸取菌液,在管壁上挤压去掉多余的菌液,均匀涂抹整个平板表面,.后沿平板内缘涂抹一周(用接种环密集划线法也可以)。
3.贴药敏片
将涂抹均匀的培养皿底部用记号笔做好标记,眼科镊子在酒精灯上灼烧灭菌待冷却后,镊取各种购买或自制的药敏片,分别贴于相应的位置上,用镊子轻轻按压纸片使药敏纸片与培养基表面密贴;药敏纸片应在培养基表面均匀分布,各纸片中心距离大于24mm,纸片距边缘距离大于15mm,这样一个直径90mm的培养皿可贴7个药敏纸片。
4培养
将贴好药敏纸片的平板倒置放于37℃±1℃恒温培养箱,培养16-18h后取出观察结果。
注意事项:
1.要求待检病料新鲜、没污染。
2.整个试验操作过程注意无菌操作。
3.培养基厚度:要求厚度为4mm,直径90mm的培养皿约25ml/平皿;菌液一定要比浊;尽量选用同一品牌、大小相同的棉拭子涂布细菌;自制药敏片的厚度须是新华1号滤纸。
4.药敏片保存:长时间不用置于-20冷冻保存,平时常用可放于4-8℃冷藏;药敏片从冰箱拿出要与室温平衡20min后打开盖使用,以免潮湿影响结果。